食品中菌落總數(shù)反映了食品在生產(chǎn)過程中的衛(wèi)生情況，體現(xiàn)食品被細菌污染的程度，是做出科學衛(wèi)生評價的重要指標之一。本文主要對國標法微生物檢測中菌落總數(shù)測定采用的傳統(tǒng)方法即平板計數(shù)法的注意事項進行相關的分析，并著重介紹了快速檢測技術在菌落總數(shù)檢測中的應用。
菌落總數(shù)檢測快速檢測新技術：
13M測試片快速分析技術
13M測試片快速分析技術概念3M測試片法是一種便捷可再生水化干膜，適用于細菌和真菌的計數(shù)。只需三步就可實現(xiàn)快速準確的測定。
①測試片中含有一種紅色指示染劑可使菌落著色,計算所有紅色菌落(不論其大小和顏色深淺均計算之).②測試片上沒有任何菌落生長.③有不多的菌落.④測試片菌落數(shù)適宜計數(shù)范圍是25-250⑤測試片面積約為20cm2,當菌落數(shù)超過250個,如5所示,為了估計菌落數(shù),可選擇其中一個或數(shù)個有代表性菌落的小方格(1cm2),計算平均菌落數(shù),再乘以20可得到整個測試片上的菌落數(shù).⑥測試片上菌落太多而無法計數(shù)⑦有很多高數(shù)量菌落,使整個生長區(qū)變粉色，應計錄為菌落太多無法計數(shù)。⑧有時菌落分布出現(xiàn)不均衡,如8所示,這也記錄為菌落太多無法計數(shù)。⑨測試片上的菌落,粗略一看是可計數(shù)的,然而,你密切注意到生長區(qū)邊緣,能看到高密度的菌落,應記錄為菌落太多無法計數(shù)。
測試片法特點
工作效率的提高根據(jù)大量數(shù)據(jù)統(tǒng)計，使用3M測試片技術，可以提高實驗室工作效率118%以上。勞動資源的使用帶來生產(chǎn)能力的提高，終的效果就是效益的增加。1.4.2標準化的檢測方法品質(zhì)穩(wěn)定的快速測試片克服了傳統(tǒng)的測試方法存在的由于使用不同批次的培養(yǎng)基，不同的配制條件，不同配制人員而導致的差異性。1.4.3化的認證方法3M快速測試的方法得到包括AOAC，AFNOR在內(nèi)的機構(gòu)的認證，在許多國家也已獲得*機構(gòu)的正式批準，從而可以確保檢測結(jié)果的可靠性和在世界各地的廣泛認可。1.4.4快速得到檢測結(jié)果對比傳統(tǒng)的測試方法，3M快速測試片縮短檢測時間，使您在更短的時間內(nèi)獲得樣品的測試結(jié)果，能更加迅速地采取有效的措施解決發(fā)現(xiàn)的問題。1.4.5方便進行HACCP認證由于檢測速度快，檢測項目全，準確性高。3M為食品生產(chǎn)工藝過程中關鍵控制點的監(jiān)控提供了較為完整的系列產(chǎn)品，可以對包括生產(chǎn)線，生產(chǎn)設備和環(huán)境在內(nèi)的各個環(huán)節(jié)進行全面的測試。
ATP法
ATP熒光法檢測總菌落數(shù)原理
螢火蟲會發(fā)光是由于它能合成將化學物質(zhì)的化學能轉(zhuǎn)變?yōu)楣饽艿纳锎呋瘎?mdash;熒光素酶、蟲熒光素(D-luciferin)以及所有細胞生物都產(chǎn)生的生物能量物質(zhì)—三磷酸腺苷（ATP）。在有氧的條件下，蟲光素酶催化蟲熒光素和ATP之間發(fā)生氧化反應，形成氧化熒光素并發(fā)出熒光。
ATP法特點：
具有成本低，操作簡單，響應速度快等特點2.2.2微生物ＡＴＰ生物發(fā)光法在國外已被廣泛地運用于食品中菌落總數(shù)的測定。
MTT法
MTT法檢測原理
檢測原理為活體微生物線粒體中含有琥珀酸脫氫酶，能使外源性MTT（噻唑藍）還原為水不溶性的藍紫色結(jié)晶甲臜(Formazan)并沉積在細胞中，而死細胞無此功能。Formazan結(jié)晶形成的量與活菌數(shù)成正比。用酶聯(lián)免疫檢測儀在490nm波長處測定其光吸收值，可間接反映活菌細胞數(shù)量。
流式細胞術
流式細胞術檢測原理檢測原理：細胞經(jīng)特異熒光素標記后，通過激光照射，產(chǎn)生特異熒光信號，通過對這些熒光信號的檢測和定量計算出菌群總數(shù)。特點：快速、便捷結(jié)果可靠、便于操作。
結(jié)語
菌落總數(shù)檢測是微生物檢測中常見的項目，在檢驗的每一個環(huán)節(jié)都應該小心謹慎，準確操作，確保檢測結(jié)果的準確度。國標法采用的平板計數(shù)法是我們常用的檢測方法，但是操作過程較為復雜，時間較長；而其他方法操作簡便，省時，但是有的成本相對較高，并且有的只針對特定的食品種類。我們應該積極關注新的科學技術在檢測方法中的應用，讓檢測更加準確、經(jīng)濟、便捷和可靠。
